Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化;有研究結(jié)果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用,在用SV-BHK、BALB-3T3、CV-1、FS-4細胞對細胞粘附實驗中,熱滅活對胎牛血清的影響小于對小牛血清的影響。
我們調(diào)查了熱滅活對胎牛血清以及對其中不同細胞株生長能力的影響。通過比較11個不同細胞株,發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對6個細胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纖維細胞,MRC-5)的生長帶來負面影響,三個細胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響,而只有兩個細胞株(Balb/3T3,Sp2/0Ag14 hybrid),在熱滅活之后,細胞生長有輕微的改善。所以,在正常的操作下,熱滅活通常對細胞的生長沒有明顯的促進作用。在正常操作下,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負面的影響,對血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,而導(dǎo)致的沉淀又常常被認為是微生物的污染。注意到這個現(xiàn)象之后,為了驗證污染的存在,或者促進沉淀的溶解,許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟,血清中的蛋白進一步的析出,為了確信血清未被污染,進行的鏡檢,無菌培養(yǎng)試驗,和革蘭氏染色試驗更是浪費了實驗者大量的時間和精力。
總之,多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。我們建議,對于那些對血清進行滅活的用戶,需要通過試驗來證實其必要性,確定滅活的適當條件;在滅活過程中,需要嚴格認真監(jiān)測,并選擇一個可重復(fù)的方案進行操作。
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